重组水解酶

β-葡萄糖醛苷酸酶

β-葡萄糖醛苷酸酶产品图

销售价

¥200/1mL

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产品详细介绍

一、 生理生化作用与催化机制(产品简介)

β-葡萄糖醛酸苷酶(Beta-glucuronidase, EC 3.2.1.31)属于糖苷水解酶家族,是一种在自然界和生物体内广泛存在的重要水解酶。

催化机制:其核心生理生化作用是催化β-葡萄糖醛酸苷键的水解。它能够特异性地切断葡萄糖醛酸与各种配基(如类固醇、药物代谢物、胆红素等)之间的糖苷键,释放出游离的葡萄糖醛酸和相应的配基(如醇、酚或胺类化合物)。

生理意义:

代谢与解毒:在人体和动物肝脏中,该酶参与葡萄糖醛酸结合反应的可逆过程,是药物代谢和胆红素代谢的关键酶。

溶酶体降解:在溶酶体中,参与糖胺聚糖(GAGs)的降解代谢。若该酶先天缺乏,会导致粘多糖贮积症(如Sly综合征)。

法医毒理:在毒理学中,该酶是水解尿液或血液中结合型药物(如大麻素、阿片类等)的关键工具,用于释放待测原型药物。

微生物与分子生物学:在大肠杆菌等微生物中,GUS是β-葡萄糖醛酸苷代谢途径的关键酶,常作为报告基因(GUS报告系统)用于植物基因工程研究。

二、 产品理化性质与规格参数

规格参数:纯度高(≥99%),剂型为液体,单管包装量为1 mL。

理化性质:

纯度:通过SDS-PAGE电泳(如图中所示)验证,呈现单一条带,分子量分布在55-75 kDa之间,纯度达99%以上,无明显杂蛋白。

表达系统:采用毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统重组表达,经发酵和纯化获得。该系统具有分泌表达、翻译后修饰(如糖基化)接近天然蛋白的优势。

稳定性:具有高稳定性,批次间差异小(批次稳定),适配性强,可替代天然来源的提取酶(如来自牛肝、蜗牛等提取的GUS)。

三、 核心产品优势

高纯度与高活性:毕赤酵母表达系统保证了酶的高效分泌和正确折叠,结合先进的纯化工艺,获得了纯度≥99%的重组酶,比活力高,可显著提升检测效率。

稳定可靠:与天然提取酶相比,重组酶具有更好的批间一致性,避免了动物源提取带来的病原体污染风险和杂质干扰。

天然替代:可作为天然来源β-葡萄糖醛酸苷酶的完美替代品,适用于对纯度要求极高的临床诊断和法医检测。

适配性强:能够适应多种反应缓冲体系(如醋酸缓冲液、磷酸缓冲液等),满足不同应用场景的定制化需求。

四、 详细应用领域解析

法医毒检与药监:

用于水解尿液中的结合物(如葡萄糖醛酸苷结合物),释放出游离的兴奋剂、毒品或其代谢物,服务于兴奋剂筛查及药物滥用监测。

临床诊断:

作为肿瘤标志物的辅助检测工具(如乳腺癌、结肠癌等某些肿瘤组织中GUS活性异常)。

用于粘多糖贮积症(如Sly综合征)的诊断,该病患者体内GUS活性显著缺乏。

环境与治疗:

环境检测:用于检测水体或食品中的大肠杆菌(利用GUS特异性底物产生荧光或显色反应)。

前药激活靶向治疗:在抗癌研究中,GUS常用于前药激活系统(ADEPT),将无毒的前药转化为有毒的活性药物,实现靶向杀伤肿瘤细胞。

五、 储存与操作注意事项

储存条件:建议-20℃低温保存。避免反复冻融,以免导致酶蛋白变性失活。短期使用(如一周内)可置于4℃保存。

操作建议:使用前请短暂离心,将管盖和管壁的液体收集至管底。根据实验需求,使用适当的缓冲液(如推荐pH 4.5-7.0)进行稀释。避免剧烈涡旋震荡,以免破坏酶的空间结构。

总结:该β-葡萄糖醛酸苷酶(GUS)是一款通过毕赤酵母重组表达获得的高端生物酶制剂。它凭借≥99%的高纯度、优异的稳定性和批次一致性,成功实现了对天然提取酶的替代。其独特的水解β-葡萄糖醛酸苷键的生化功能,使其在法医毒检、临床诊断、环境检测及前药激活靶向治疗等多个高精尖领域发挥着不可或缺的作用。

β-葡萄糖醛苷酸酶常见问题

1. β-葡萄糖醛酸苷酶 GUS 是什么?

答:β-葡萄糖醛酸苷酶(β-Glucuronidase,GUS)是一类能够催化β-葡萄糖醛酸苷键水解的酶,可作用于多种葡萄糖醛酸结合物。重组GUS采用毕赤酵母表达系统获得,并经过蛋白质纯化工艺制备,为相关检测及生物分析提供高纯度酶制剂。

2. GUS主要催化什么反应?

答:GUS主要催化β-葡萄糖醛酸苷键的水解,使葡萄糖醛酸结合物发生断裂并释放相应的游离化合物。在分析检测中,可利用这一特性对葡萄糖醛酸结合物进行酶促水解,为后续检测提供基础。

3. β-葡萄糖醛酸苷酶的主要来源有哪些?

答:β-葡萄糖醛酸苷酶可来源于多种生物体系,包括微生物及动物等。传统GUS产品可通过天然来源获取,而本产品采用毕赤酵母重组表达方式获得,经过发酵和蛋白纯化制备重组酶。

4. GUS为什么采用毕赤酵母表达?

答:本产品通过毕赤酵母表达系统获得重组GUS,再经过蛋白纯化工艺获得高纯度酶制剂。重组表达能够建立标准化生产流程,并有利于获得来源明确、批次稳定的酶产品。

5. 重组GUS与天然提取GUS有什么区别?

答:重组GUS通过基因工程和毕赤酵母表达获得,而天然提取GUS则依赖天然组织或微生物来源进行分离。重组表达方式能够减少天然原料差异带来的影响,并有利于获得高纯度、批次稳定的酶制剂。

6. 重组GUS的纯度如何?

答:产品经过蛋白质纯化工艺获得高纯度重组酶,宣传页显示产品纯度可达到≥99%。高纯度能够减少非目标蛋白对后续检测体系的干扰,并有利于提高检测体系的稳定性。

7. GUS具有哪些产品优势?

答:重组GUS主要具有高酶活性、优异稳定性、高纯度以及批次稳定性等特点。通过毕赤酵母表达及蛋白纯化工艺获得的重组酶,可满足分析检测及相关生物应用需求。

8. 为什么GUS适合用于分析检测?

答:GUS能够特异性催化β-葡萄糖醛酸苷键水解,并可与相应底物建立酶促反应体系。通过检测反应产生的信号,可以实现目标物的定性或定量分析,因此适合作为分析检测中的工具酶。

9. GUS在检测中主要发挥什么作用?

答:GUS主要通过水解葡萄糖醛酸结合物,使结合型目标物转化为游离形式,从而便于后续检测分析。在不同检测体系中,可以根据目标物性质选择相应底物及检测方法。

10. GUS可以与芳基硫酸酯酶复配吗?

答:可以根据具体检测目的进行复配。GUS主要负责β-葡萄糖醛酸苷结构的水解,而芳基硫酸酯酶主要负责硫酸酯结构的水解,二者具有不同的底物作用特征。在需要同时处理葡萄糖醛酸结合物和硫酸酯结合物的检测体系中,可根据具体应用开发复合酶体系。

11. GUS和芳基硫酸酯酶为什么经常被组合使用?

答:在复杂生物样品中,不同代谢物可能分别以葡萄糖醛酸结合物或硫酸酯结合物形式存在。GUS和芳基硫酸酯酶分别作用于两类结合结构,组合使用能够扩大酶促水解覆盖范围,因此适合用于部分代谢物分析和样品前处理体系。

12. GUS的纯化为什么重要?

答:高纯度GUS能够减少宿主蛋白及其他杂质对检测体系造成的影响。在分析检测、酶学研究及前药激活等应用中,较高纯度的酶制剂有利于获得更加清晰、稳定的实验结果。

13. 重组GUS的批次稳定性如何?

答:重组GUS采用毕赤酵母表达及标准化蛋白纯化工艺制备,相较天然来源提取方式,有利于减少原料差异带来的批次波动。产品定位强调高稳定性及批次稳定,可用于建立标准化检测体系。

14. GUS适合用于高通量检测吗?

答:GUS能够与显色或其他信号检测体系结合,因此可以根据检测平台建立相应的高通量分析方法。对于需要批量处理样品的检测场景,可通过统一酶量、底物浓度和反应条件提高检测体系的一致性。

15. GUS的酶活如何测定?

答:GUS酶活可采用相应的β-葡萄糖醛酸苷底物进行测定,通过监测底物水解产生的可检测产物变化计算酶活。实际酶活测定应根据所采用的底物、缓冲体系、温度和检测方法确定具体条件。

16. GUS的最适反应条件是什么?

答:不同来源的GUS在最适pH、温度及底物条件方面存在差异。对于本产品,实际使用时应按照产品说明书提供的推荐反应条件进行检测,以保证酶活性和检测结果稳定。

17. GUS可以保存多久?

答:GUS建议采用低温条件保存,以降低蛋白质降解和活性损失。具体有效期应根据产品标签及稳定性验证结果确定,使用过程中应避免长时间处于高温环境及反复冻融。

18. GUS的储存条件是什么?

答:产品建议-20℃低温保存,避免反复冻融;短期使用时可按照产品说明书要求置于4℃保存。具体储存条件及有效期以产品标签和产品说明书为准。

19. 重组GUS相比天然来源GUS有哪些产品化优势?

答:重组GUS采用毕赤酵母表达技术获得,并通过蛋白质纯化获得高纯度酶制剂。其主要优势包括来源明确、高纯度、高稳定性、批次稳定以及天然来源替代能力,适合用于标准化检测产品及相关酶制剂开发。

20. GUS适合哪些应用领域?

答:GUS可应用于法医毒检、临床诊断、环境与微生物检测以及前药激活研究等领域,包括水解尿液结合物、兴奋剂检测、乳腺癌及结肠癌相关标志物研究、粘多糖贮积症相关检测、大肠杆菌检测以及前药靶向激活等。

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